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常压条件下采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物,灭菌时间通常为30-60分钟。该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌,但不能保证杀灭所有芽孢,是非可靠的灭菌方法。
间歇蒸汽灭菌法利用反复多次的流通蒸汽加热,杀灭所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽灭菌法,但要重复3次以上,每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜,目的是使芽胞发育成繁殖体。若被灭菌物不耐100℃高温,可将温度降至75℃~80℃,加热延长为30~60分钟并增加次数。适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
高压蒸汽灭菌法需要103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃,维持15-20分钟。
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